描述
FluidicLab智能LNP合成仪（LNP-S1）— 纳米级脂质颗粒一体化解决方案
在制备脂质纳米颗粒 LipidNanoparticle（LNP）的过程中，关键步骤 是 磷 脂 和 缓 冲 液（ 缓冲液中溶解有mRNA、siRNA等生物大分子）在微流控芯片中快速均匀混合，自组装成LNP。微流控LNP制备平台具备粒径和单分散度高度可控、批次之间高重复性、低样品消耗、易操作等优势，可大幅度提高客户前期配方筛选效率。
| 粒径高度可控，粒径均一
粒径从40 nm到200 nm可控，单分散度（PDI）低于0.02；
| 批次重复性高
全自动化系统，无管路连接，无需启动和清洁，消除不同批次的可变性；
| 智能控制
可自动检测芯片堵塞和泄漏等异常情况，自动停机，节约用户宝贵原料；
| 耗材成本低
芯片强度*高，耐压50大气压，可经过清洗重复使用；
| 操作简易
无需外接电脑，全触屏配置，实验参数可加载或保存，开机30秒内即可开始制备；
| 运行高效
设备兼容国内外一次性注射器型号，单次运行时间 9~40s，一天内可完成上百种配方筛选。
| 智能控制
- 内置压力与位置传感器，精准控制样品流速；
- 双通道独立控制，流速比灵活设置；
- 自动检测芯片堵塞和泄漏等异常情况，自动停机；
- 快速到达设定流速，大幅度减少前废液体积。
- LNP粒径：40~200 nm；
- 总流速范围：0.04 ~ 40 mL/min（ 乙醇和水按照1:3设置）；
- 鱼骨形混合结构，层流混合时间＜3 ms；
- COC材质，耐压 50 Bar 以上，无泄漏堵塞风险；
- 无需管路，芯片与注射器直接连接。
- 复方磷脂和缓冲液，即开即用；
- 可包裹 mRNA mRNA，siRNA，CRISPR/Cas9 等核酸；
- >95% 的转染率；
- 低毒性；
- 可提供完整实验方案。
实验案例：
图 1、 LNP 原液粒径分布 图 2、 LNP 原液经稀释超滤后粒径分布
图 3、 包裹 SARS-CoV-2 NTD-RBD 图 4、 Cryo-EM 检测生成的 LNP
部分 mRNA 的 LNP 终产物
图 5、包裹 GFP mRNA 的 LNP 转染细胞后，80% 图 6、 包裹 Luciferase mRNA 的 LNP
以上细胞均表达 GFP 注射小鼠后的活体成像结果
智能LNP(脂质纳米颗粒)合成仪使用操作演示视频
LNP包封试剂盒说明书
产品名称： LNP包封试剂盒
英文名称：Liposome nanoparticle encapsulation kit
组分信息：
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产品名称 |
规格 |
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复方磷脂M，8 mM（5 mg/mL） |
1 mL |
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复方磷脂P，8 mM（5 mg/mL） |
1 mL |
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50mM 柠檬酸钠缓冲液，pH4.0 |
3 mL |
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10mM PBS缓冲液，pH7.4 |
120 mL |
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Tris 缓冲液（含8%蔗糖），pH7.4 |
120 mL |
【保存条件】 4℃密封保存
【复方磷脂制备脂质纳米颗粒建议方案】
- 计算核酸用量：
核糖核苷酸的平均分子量为339.5，形成RNA时要脱去一分子水，因此分子量按330.5计算。脱氧核糖核苷酸的平均分子量为327.0，形成DNA时要脱去一分子水，因此分子量按318.0计算。
以可电离脂质比例计算氮原子数，每摩尔复方脂质中含有 0.5 mol氮原子。
- 试剂选择推荐：
| 保存方式 | 稀释/储存缓冲液 |
| 4℃保存 | 10mM PBS缓冲液，pH 7.4 |
| 冷冻保存 | Tris 缓冲液（含8%蔗糖），pH 7.4 |
- 脂质纳米颗粒制备：
以mRNA制备LNP为例：将mRNA溶解到50mM pH4.0的柠檬酸钠缓冲液中，使终浓度为0.073 μg/μL。
利用微流控设备，将含有核酸的柠檬酸钠缓冲液与磷脂在相应芯片中混合，相应参数参考下表，所得LNP使用30倍体积的缓冲液稀释，100KD超滤管，3000g离心超滤浓缩到所需体积，选择上述（2）中条件保存。
| 芯片型号 | 注射器型号 | 缓冲液与磷脂混合比例（v/v） | 流速（mL/min：mL/min） |
| LNP-B1 | 10 mL，3 mL | 3 ：1 | 18 ：6 |
设备参数
